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分子研发技术平台
1、 POCT技术平台

POCT的基本原理是把传统分析仪器微型化,操作方法简单化,使之成为便携式和手掌式的设备。应用实时快速荧光定量PCR技术及核酸快速释放技术,通过扩增产物的荧光信号的变化实现对病毒核酸的监测。同时,还可以实现在一个反应体系下检测多种病原体,方便快捷,在临床医疗、健康管理、军事管理、生物应急、动物卫生等场合均有广泛的应用。POCT技术平台在分子诊断的基础上融入POCT快速的优势,进行呼吸道系列产品的研发工作。


POCT 产品具有三个方面的鲜明特色:

1. 检测时间:POCT产品缩短了从样本采集、检测到结果报告的检测周期;

2. 检测空间:POCT 属于在被检测对象身边的检测;

3. 检测的操作者:POCT 的操作者可以是非专业检验师,甚至是被检测对象本人。


2、 反向点杂交法技术平台

PCR-反向点杂交法技术是采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的基因检测技术。该技术采用生物素标记的引物进行靶序列的扩增,将扩增产物同固定在膜条上的特异性探针进行杂交,一次杂交反应可同时检测多种靶序列。广泛应用于病原体检测、基因突变检测、基因分型及遗传多态性检测等方面,具有潜在的临床应用价值。其技术原理如下图所示。反向点杂交法技术平台开发的人乳头瘤病毒基因分型(25型)检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)可以针对女性宫颈脱落上皮细胞样本中的25种HPV进行检测和分型。


技术特点:

  1. 该技术具有快速、简便、高灵敏度的特点,同一反应管可以检测多种靶标片段,在病原体检测、基因突变检测、基因分型及遗传多态性检测中具有显著的优势。

  2. 特异性高。扩增产物同探针结合具有高特异性。

  3. 适用范围广。广泛应用于病原体检测、基因突变检测、基因分型及遗传多态性等多个领域,具有潜在的临床应用价值。

  4. 操作简单。反应液为预分装试剂,直接加入模板就可进行扩增。


3、甲基化技术平台

基因甲基化是遗传表观学的重要组成部分。甲基化修饰异常是肿瘤发生过程中的早期事件,是细胞的遗传本质和外界环境影响共同作用的结果。基因的启动子区域发生甲基化修饰后,往往使得该基因的表达下调,随之影响了细胞内一系列的分子事件,最终导致细胞发生癌变,图1为宫颈癌变过程。利用分子诊断方法对肿瘤DNA甲基化程度进行测定,可以辅助诊断肿瘤及判断预后,对肿瘤的筛查和风险评估、早期诊断、预后诊断及治疗检测具有重要的意义。


开云体育官网登陆入口分子研发团队针对已有的HPV和TCT产线布局,利用新建的甲基化技术平台开发宫颈癌甲基化检测产品。图2为开云体育官网登陆入口团队开发的宫颈癌甲基化检测产品实验操作流程为:标本采集/暂存→脱落细胞gDNA提取→DNA浓度检测→亚硫酸盐化学转化→bisDNA纯化→荧光PCR反应→结果判读。


4、探针熔解曲线技术平台

探针熔解曲线技术是通过实时监测温度变化过程中探针的荧光强度变化情况,从而得到荧光强度随温度变化的曲线,然后通过对荧光强度随温度的变化进行转换,得到直观的探针熔解曲线峰图。荧光探针与不同靶序列杂交,形成的双链杂交体的稳定性也不同,故具有不同的Tm值。其技术流程如下图1所示。探针熔解曲线技术平台针对药物代谢基因、人类白细胞抗原基因以及HPV感染进行检测,在SNP检测、基因多态性分型以及HPV高低危分型等方面有广泛应用。


技术特点:

  1. 检测通量高。同一反应管可检测十几种甚至更多靶标片段,在病原体分型检测、多重耐药基因检测、用药指导基因筛查等方面具有显著优势。

  2. 对SNP位点识别特异性高。可以分辨出靶序列和荧光探针匹配程度,对SNP位点就有高的检测特异性。

  3. 适用范围广。可在在肿瘤、遗传和微生物等多个领域中进行应用。

  4. 成本低廉。在检测相同数量靶序列的情况下荧光探针熔解曲线技术所需的荧光探针数量远少于传统实时荧光PCR技术。